Im Wettbewerb starten neben den 36 Erst- und Zweitligisten der vergangenen Spielzeit, die vier bestplatzierten der 3. Liga sowie 21 Landespokalsieger und die 3 Finalisten der 21 Landesverbände des Deutschen Fußball Bundes. Der 1. FC Union Berlin befindet sich neben den 18 Erstligisten sowie weiteren 13 Zweitligisten in Lostopf 1. Im zweiten Lostopf befinden sich 4 Zweitligisten, sowie 28 Amateurteams.

Die 1. Hauptrunde wird vom 13. bis 16. August 2010 ausgespielt, das DFB-Pokalfinale findet am 21. Mai 2011 im Olympiastadion statt.

Bundesliga | 18 Vereine der Saison 2009/10
FC Bayern München (Titelverteidiger)
FC Schalke 04
Werder Bremen
Bayer 04 Leverkusen
Borussia Dortmund
VfB Stuttgart
Hamburger SV
VfL Wolfsburg
1. FSV Mainz 05
Eintracht Frankfurt
TSG 1899 Hoffenheim
Borussia Mönchengladbach
1. FC Köln
SC Freiburg
Hannover 96
1. FC Nürnberg
VfL Bochum
Hertha BSC

2. Bundesliga | 18 Vereine der Saison 2009/10
1. FC Kaiserslautern
FC St. Pauli
FC Augsburg
Fortuna Düsseldorf
SC Paderborn 07
MSV Duisburg
Arminia Bielefeld
TSV 1860 München
Energie Cottbus
Karlsruher SC
SpVgg Greuther Fürth
1. FC Union Berlin
Alemannia Aachen
Rot-Weiß Oberhausen
FSV Frankfurt
Hansa Rostock
TuS Koblenz
Rot Weiss Ahlen

3. Liga 09/10 | 4 Bestplatzierte der Saison 2009/10
VfL Osnabrück
FC Erzgebirge Aue
FC Ingolstadt 04
Eintracht Braunschweig

Verbandspokal | 21 Sieger plus 3 Finalisten (Ligenzugehörigkeit in Klammern)
SV Sandhausen (3L)
SSV Jahn Regensburg (3L)
Wacker Burghausen (3L)
Berlin Ankaraspor (OL)
SV Babelsberg 03 (RL)
FC Oberneuland (RL)
SC Victoria Hamburg (OL)
Kickers Offenbach (3L)
Torgelower SV Greif (OL)
TSV Germania Windeck (OL)
Schwarz-Weiß Essen (OL)
SV Wilhelmshaven (RL)
TuS Heeslingen (OL)
Eintracht Trier (RL)
SV 07 Elversberg (RL)
Chemnitzer FC (RL)
Hallescher FC (RL)
VfB Lübeck (RL)
SC Pfullendorf (RL)
FK Pirmasens (OL)
ZFC Meuselwitz (RL)
Preußen Münster (RL)
SC Verl (RL)
VfR Aalen (3L)